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    脂肪測定儀提取桔梗總皂苷測定方法研究

    來源: http://www.jiansheschool.com  類別:實用技術  更新時間:2015-03-24  閱讀

      桔梗為桔梗科多年生雙子葉草本植物桔梗Platycodon grandiflorum (Jacq.)A.DC. 的干燥根,是傳統大宗類常用中藥材之一,性味苦、辛、平,歸肺經,有宣肺、利咽、祛痰、排膿之功效。臨床常用于咳嗽痰多,胸悶不暢,咽腫,音啞,肺癰吐痰,瘡瘍膿成不潰等癥。《中國藥典》2005 年版一部桔梗藥材標準中以桔梗總皂苷含量作為藥材質量評價的主要指標,并采用傳統的索氏提取器法進行提取測定。筆者在長期實踐中發現,利用這一方法進行桔梗皂苷含量測定費工費時、效率低,單個樣品耗費藥品量大,難以同時進行批量提取處理。為解決這一難題,本文利用脂肪測定儀對桔梗總皂苷提取方法進行了試驗探索,并與傳統的索氏提取器法進行了比較分析。

      1 試驗方法

      1.1 材料 二年生桔梗藥材(代號 :060302),取自山東省農科院中藥材科技示范基地(山東蒙陰)。

      1.2 試劑 甲醇、乙醚均為分析純 ,水為重蒸餾水。

      1.3 儀器 索氏提取器,SZF-06C 脂肪測定儀(杭州托普儀器有限公司)。

      1.4 索氏提取器(藥典方法)法 按《中國藥典》2005 年版一部桔梗項下含量測定方法進行。

      1.5 脂肪測定儀提取法 取桔梗樣品粗粉約 4 g,精密稱定,置于抽提筒吊籃內,加 50 mL 甲醇,浸泡 15 h。將抽提筒內吊籃提升 5 cm,同時將冷凝管調節旋塞開啟,加熱回流 6 h,抽提物放置過夜。濾過,關閉冷凝器調節旋塞,加熱濾液濃縮至 15~20mL,放冷,加乙醚 50 mL,振搖,放置至澄明,棄去上清液,沉淀分次加甲醇(20 mL,10 mL,5mL)加熱使溶解,放冷,濾過,合并甲醇液,濾液濃縮至 15~20 mL,放冷,加乙醚 50 mL,振搖,同上法處理,合并甲醇液,置已恒重的蒸發皿中,于水浴鍋上蒸發至干,在 105 ℃干燥至恒重,計算,即得桔梗總皂苷。

      2 結果與討論

      2.1 兩種方法測定結果比較 將同一批次的桔梗藥材(060302)委托給濟南市藥品檢驗所,按照《中國藥典》2005 年版一部桔梗含量測定方法進行測定 ;在實驗室內采用脂肪測定儀對同一批次的桔梗藥材(060302)進行提取測定,重復 3 次,結果表明,兩種提取方法測定的結果間無顯著差異 (P > 0.05)。脂肪測定儀提取法可以替代藥典規定方法測定桔梗總皂苷含量。

      2.2 兩種方法溶劑回收量的比較 用索氏提取器進行提取時,加入的甲醇在實驗過程中都通過蒸發進行濃縮,揮發出的有機溶劑不但對空氣造成一定的污染,而且對實驗人員造成人身傷害。如果采用旋轉蒸發儀進行有機溶劑回收,由于提取物在容器間的轉移,容易造成較大的測定誤差。而采用脂肪測定儀提取法在回收溶劑時則避免了上述現象,可以方便地進行濃縮的同時回收溶劑。試驗表明,每次每個樣品可以回收甲醇 50~75 mL,每次可同時測定6個樣品,共回收甲醇約 300~450 mL。

      2.3 兩種方法在提取工序上的比較 實踐中,索氏提取器在抽提和濃縮兩個環節的轉換中要更換不同的儀器,工序比較復雜,而 SZF-06C 脂肪測定儀則不存在這個環節,只需轉動旋鈕就可完成轉換,并且 SZF-06C 脂肪測定儀有 6 個抽提瓶,對于大批量的測定材料,比傳統測定方法具有明顯優勢。

      3 小結

      實驗表明,脂肪測定儀法測定桔梗總皂苷含量數據準確,重復性好,可以替代傳統索氏提取法,測定過程簡化,對于樣品的批量處理具有顯著優勢,是一種簡便高效、經濟環保的桔梗皂苷提取測定法。

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