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    凱氏定氮儀精準測定糧食粗蛋白的步驟

    來源: http://www.jiansheschool.com  類別:實用技術  更新時間:2015-03-27  閱讀

      凱氏定氮儀精準測定糧食粗蛋白的步驟

      1 原理

      在樣品消化液中加入適量鋁片和固氫氧化納,從而利用強堿與鋁反應產生氫氣和大量熱,使樣品消化液中的按鹽以氨的形式排出:

      NH3隨著HZ進入硼酸吸收液被吸收,最后通過鹽酸滴定硼酸吸收液所消耗的體積數(shù),即可確定樣品中粗蛋白含量。

      2 材料與方法

      2.1材料

      2.1.1試劑分析純固體氫氧化鈉。鋁片:用輸液瓶鋁蓋,每個剪成4小片,并預先用5%NaOH浸泡數(shù)分鐘,然后用清水洗至中性,涼干;也可用鋁電線打壓成片狀,經洗滌處理。其它試劑同GB.

      2.1.2樣品面粉、不米面、小米、大米,

      2.2方法

      2.2.1樣品消化同GB方法。

      2.2.2瀏定取5ml定容混勻的消化液于25oml三角瓶中,加新蒸餾水Zoml,加29鋁片,最后加59固體NaOH,立即蓋上帶有彎管的橡皮塞,并將彎管末端插入盛有30ml%硼酸液內km深處(硼酸液預先加2滴混合指示劑),反應10分鐘。取下吸收瓶,用olmol/L鹽酸標準液滴定至淺紫色即達終點,同時做空白試驗,然后根據(jù)滴定消耗鹽酸量,按GB計算公式計算樣品粗蛋白干基含量。

      3 結論與討論

      3.1實驗結果

      3.1.1對比實驗在與原標準方法對比試驗中,二者結果無顯著差異(P>0.05)月。改進法測定結果略高八方么。實驗見表1

      3.1.2準確度與精度實驗選用分析純硫酸錢作標準物進行含氮量試驗,其結果見表2.由表2可見,改進法測定硫酸按含氮量的標準差為0.03,變異系數(shù)為0.2%,相對誤差0.52%.

      3.2方法討論

      3.2.1本法特點 所需凱氏定氮儀設備簡單,試劑亦極為普通,操作更為簡便、快速,無需加熱設備,既節(jié)約費用,又便于基層推廣。

      3.2.2實驗條件

      選擇本法中固體NaOH和鋁片的使用量直接影響著樣品消化液中氨的蒸餾與吸收程度,為此,我們用已知蛋白質含量樣品,并采取其它實驗條件不變,而僅改變某一條件量進行了鋁片、固體NaOH加入量和蒸餾反應時間的試驗,初步結果我們認為:鋁片29,固NaOH5g,反應蒸餾時間10分鐘,即可達到較滿意的測定效果。

      3.2.3實驗注意事項

      3.2.3.1實驗中有大量HZ放出,所以需注意避免明火。

      3.2.3.2樣品消化液要隨稀釋隨蒸餾測足,不能放置太久,否nylJ影響測定結果。

      3.2.3.3加入鋁和氫氧化鈉時。其順序不可顛倒,且鋁片不要剪得過碎,否則,產生H:速度過快,會影響硼酸對氨的吸收效果。

      3.23.4蒸燦元畢后樣品殘液堿度較大,需注意防腐和燒傷;另外,導管末端需用少量蒸餾水沖洗二次,洗液入硼酸吸收液。

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