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    半自動定氮儀在食品蛋白質含量測定的優勢

    來源: http://www.jiansheschool.com/  類別:實用技術  更新時間:2014-05-26  閱讀
      凱氏定氮法是我國各類食品蛋白質含量測定的標準方法,但是,在實際工作中也存在著一些不盡如人意的地方,最突出的表現在樣品消化處理上,消化的溫度不僅高而且時間很長,這也就導致了整個測定分析實驗的時間長。因此能夠快速測定食品蛋白質含量的方法,有著十分重要的意義。
      
      我們根據工作實際及積累的工作經驗對這方面的問題進行了一些探討,選用富含糖類、脂類的速溶奶粉為對象,采用三氯乙酸沉淀法分離出奶粉中的乳蛋白,然后采用甲醛固定法測定出其游離氨基含量,并通過與其凱氏定氮測出的蛋白質含量進行比較,得出了奶粉蛋白質含量與奶粉的游離氨基含量之間的比例關系,結果令人滿意,同時避免了樣品消化處理等繁瑣步驟,達到了快速測定的目的。現將具體的操作簡介如下:
      
      1.儀器與試劑:半自動定氮儀、精密pH計,電磁攪拌器、離心機、10%三氯乙酸溶液、0.06NNaOH溶液、36%甲醛溶液、0.05NHCI溶液、2%硼酸溶液、指示劑等以及樣品消化用試劑,均采用AR級試劑。
      2.方法:取不同廠家、不同批號的奶粉樣4個,稱取129左右溶解后定容至looml,振蕩均勻后按下述處理進行.
      2.1凱氏定氮:取sml樣品溶液加人15ml濃HZSO;、1.59KZSO一、Zml10%CuSO‘,然后在紅外爐上450oC消化處理至完全透明;冷卻后消化液定容至100ml,取20ml在蒸餾器上加堿蒸餾,餾出液用2%硼酸吸收并用0.05NHCI滴至終點,平行一次,同時作空白試驗。根據測定結果計算奶粉中蛋白質含量(g八009).
      2.2甲醛固定法測氨基:取10ml樣品溶液加人到大離心管中,加人10ml三氯乙酸溶液后混勻,放置10min,離心smin(4000轉/分);傾去上層清液后,沉淀用50一60ml去C02水,分次將其轉移至250ml燒杯中,隨后置于電磁攪拌器上并先用0.06NNa0H調節pH至8.
      2;再加人20ml甲醛溶液,imin后用o.o6NNa0H調節pH至9.2,并記錄其堿消耗體積;平行一次并作空白試驗;根據測定數據計算奶粉中氨基含量(mmol/g)。
      3.半自動定氮儀測定結果:4個樣品的測定結果,將各樣品的蛋白質含量除以其氨基含量可以得到結果,可見,在不同的4個樣品中蛋白質含量與氨基含量比值差異甚微,平均為1.835(S=0.0049,C,=0.27%),說明了奶粉中蛋白質的含量與其甲醛法測定出的氨基含量成正比,因而也表明了在實際工作中直接利用甲醛固定法測定蛋白質含量是可行的。若直接利用1.835的常數與表2中的結果相乘則可計算出4個樣品的蛋白含量分別為(g/g):0.1879、0.2147、0.2019、0.1237,結果幾無差別。
      
      通過半自動定氮儀以及其它相關試劑的測定分析,我們可以總結出,在利用0.05一0.06NNa0H溶液進行測定1.29樣品的游離氨基時,即使是滴定誤差為土0.04ml,其蛋白質含量的誤差也只有士0.0049/g,基本可以滿足一般分析的耍求,但是與凱氏定氮法相比卻省去了消化處理,而且由于利用三氯乙酸沉淀分離出乳蛋白,可以除去一些雜質的干擾,因此不僅省時省力,且其結果更準確可靠.
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